Care este scopul anticorpului primar într-o Western blot?
Care este scopul anticorpului primar într-o Western blot?

Video: Care este scopul anticorpului primar într-o Western blot?

Video: Care este scopul anticorpului primar într-o Western blot?
Video: Q&A – Care este scopul unei Coronarografii? 2024, Iulie
Anonim

Cu metoda de detectare directă, o enzimă sau un fluorofor conjugat anticorp primar este utilizat pentru a detecta antigenul de interes pe șterge . În metoda de detectare indirectă, o etichetă neetichetată anticorp primar este folosit mai întâi pentru a se lega de antigen.

Mai mult, ce este anticorpul primar în Western blot?

The anticorp primar recunoaște și leagă epitopul sau secvența specifică de aminoacizi a proteinei de interes. Secundar anticorpi folosit pentru western blot sunt conjugate de obicei cu o enzimă; cele mai frecvent utilizate enzime sunt Peroxidaza de ridiche de cal (HRP) și fosfataza alcalină (AP).

În plus, ce face anticorpul primar? Anticorpii primari sunt imunoglobuline care se leagă de un antigen specific ( proteină , peptidă, moleculă mică etc.) de interes și sunt de obicei neconjugate. Un anticorp primar bun recunoaște și se leagă cu afinitate și specificitate ridicate pentru a purifica, detecta și măsura antigenul.

În consecință, care este scopul unei Western blot?

A western blot este o metodă de laborator utilizată pentru a detecta molecule de proteine specifice dintr-un amestec de proteine. Apoi, moleculele de proteine sunt separate în funcție de dimensiunile lor folosind o metodă numită electroforeză pe gel. După separare, proteinele sunt transferate din gel pe a ștergere membrană.

Cum se folosesc anticorpii în Western blotting?

Anticorpi sunt folosit pentru a detecta proteinele țintă pe western blot (imunoblot). The anticorpi sunt conjugate cu etichete sau enzime fluorescente sau radioactive care dau o reacție ulterioară cu un reactiv aplicat, ducând la colorarea sau emisia de lumină, permițând detectarea.

Recomandat: